高壓氣體基因槍應(yīng)用微核組氨酸在細(xì)胞中的定位

產(chǎn)品介紹

　　基因槍技術(shù)(顆粒轟擊)是一種高效的基因?qū)爰夹g(shù)，利用高壓氣體，將包裹核酸的金或鎢微粒加速到所需速度，轟擊組織、器官、植物組織等樣品，實(shí)現(xiàn)外源核酸的高效穩(wěn)定轉(zhuǎn)化和表達(dá)，具有快速、簡便、安全、高效的特點(diǎn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)

通用性強(qiáng)：基因槍可以應(yīng)用于植物組織、動(dòng)物細(xì)胞、微生物、藻類等多種實(shí)驗(yàn)對(duì)象

轉(zhuǎn)化率高：相較于常規(guī)方法，操作簡單，可獲得更多的轉(zhuǎn)化細(xì)胞

快速清潔：轟擊室獨(dú)特的圓形轉(zhuǎn)化室，可拆卸,方便快速清洗消毒

壓力可調(diào)：可在3-12MPa之間調(diào)節(jié)和優(yōu)化

可選載體膜： 根據(jù)不同受體，可選用飛行膜或鋼膜

成本低： 每槍除高壓氣體外成本18元左右

標(biāo)準(zhǔn)配置部分展示

應(yīng)用領(lǐng)域

基因功能短暫表現(xiàn)之研究

遺傳或癌癥相關(guān)之研究

基因治療相關(guān)之研究

基因工程或藥物相關(guān)研究

功能穩(wěn)定性表現(xiàn)之研究

DNA疫苗的研究與應(yīng)用

基因轉(zhuǎn)殖植物之研究

實(shí)驗(yàn)舉例

　　為了研究細(xì)胞不同生長階段過程中微核組氨酸MLH1在細(xì)胞中的定位，山西大學(xué)王偉課題組Qiao J , Jing X , Tao B等人通過高壓氣體基因槍將攜帶標(biāo)簽的MlH1片段轉(zhuǎn)化到CU428和B2086中。免疫染色結(jié)果顯示生長細(xì)胞中，HA-MLH1定位于微線體中，其他類型的組蛋白定位于胞質(zhì)中。

生長過程中HA-Mlh1,HA-α, HA-β, HA-γ和HA-δ的定位情況。HA-標(biāo)簽蛋白被anti-HA抗體和被DAPI染色的DNA所識(shí)別。尺寸10μm。

　　利用基因槍將外源基因轉(zhuǎn)導(dǎo)到寄生蟲Eimerian coccidia中，優(yōu)化外源基因?qū)敕椒ǎ阌诤笃趯?duì)于該寄生蟲防治研究。中國農(nóng)業(yè)大學(xué)索勛課題組 Li J , Zou J , Yin G 等人采用7MPa氦氣，65mm轟擊距離和-0.098MPa的真空度的基因槍轟擊條件，利用鎢粉包裹DNA實(shí)現(xiàn)外源基因的高效轉(zhuǎn)化，隨后用PCR驗(yàn)證該基因轉(zhuǎn)化的有效性。

A為原始細(xì)胞BC為轟擊后的細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)由明顯的鎢粉顆粒。

　　西南大學(xué)羅克明課題組Ye S , Jiang Y , Duan Y 等人為研究PtoWRKY60(一種乳清蛋白)在楊樹不同組織的表達(dá)情況和作用，利用高壓氣體基因槍將基因轉(zhuǎn)導(dǎo)到楊樹不同組織中，通過定量PCR研究基因的轉(zhuǎn)錄水平，通過表觀表征觀測蛋白的調(diào)控作用，研究相關(guān)調(diào)控機(jī)制。

a.熒光定量PCR結(jié)果顯示不同組織中PtoWRKY60的轉(zhuǎn)錄水平 b.一周的幼苗 c.花朵  d.4周幼苗 e.從4周幼苗上分離的葉片

　　中國農(nóng)業(yè)大學(xué)冷平課題組Liang S , Liu S , Jie R等人研究β-葡萄糖醛酸酶GUS在番茄成熟過程中的表達(dá)調(diào)控作用，利用基因槍將GUS表達(dá)基因以質(zhì)粒形式轉(zhuǎn)化到番茄中進(jìn)行研究。基因槍轟擊條件：1100psi壓力，每槍0.83ug質(zhì)粒濃度，轟擊距離6cm進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

四個(gè)不同成熟階段轟擊番茄表面的不同效果。a.初期b.成熟青果階段c.轉(zhuǎn)變階段d.紅果成熟階段e.青果中間處轟擊后f.青果肩處轟擊后g.青果分離區(qū)轟擊后，其中藍(lán)點(diǎn)是GUSgene表達(dá)產(chǎn)物染色痕跡，a中黑點(diǎn)是標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)，確定大小。