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介紹和解釋實驗室儀器的工作原理、操作步驟、維護保養(yǎng)、技術規(guī)范、應用案例等內容
研究摘要
2022年8月,湖北省宜昌市養(yǎng)魚場發(fā)生了大規(guī)模黃顙魚死亡事件,研究人員從患病黃顙魚體內分離出了一株致病菌,并且經(jīng)過形態(tài)學、生理生化特征以及16S rRNA基因序列和系統(tǒng)發(fā)育分析,將其鑒定為海豚鏈球菌(Streptococcus iniae)。
通過對這株海豚鏈球菌的全基因組測序,研究人員發(fā)現(xiàn)該菌含有一條長度為1,776,777? bp的環(huán)狀染色體,GC含量為37.14%?;蚪M序列分析顯示,這株菌具有204個毒力相關基因和127個抗生素耐藥基因。進一步實驗表明,這株海豚鏈球菌具有極高的致病性,半數(shù)致死量(LD50)為9.53?×?105 CFU/g。組織病理學檢查顯示,感染該菌株后,黃顙魚的多個器官如皮膚、鰓、鰭、脾臟、肝臟、腎臟、腸道、眼睛和大腦等部位出現(xiàn)了細胞大面積變性、壞死、出血和炎癥反應。
感染后,黃顙魚血清中的酸性磷酸酶和堿性磷酸酶等先天免疫酶活性在24和48小時后顯著升高,然后在168小時后降低。此外,研究團隊還在感染后的不同時間點檢測了黃顙魚體內免疫相關基因的轉錄情況,發(fā)現(xiàn)這些基因的轉錄水平顯著上調,這表明宿主體內的免疫系統(tǒng)在抵抗海豚鏈球菌感染的過程中發(fā)揮了重要作用。
此次研究不僅明確了海豚鏈球菌是導致黃顙魚大規(guī)模死亡的直接原因,還提高對海豚鏈球菌入侵的致病機制和宿主防御系統(tǒng)的認識,為后續(xù)的疾病防控工作提供了重要的理論依據(jù)。
MGC系列微生物生長曲線分析儀的應用
為了更好地理解海豚鏈球菌的生長特性,研究團隊使用了MGC系列微生物生長曲線分析儀MGC-200來自動檢測生長曲線。
將海豚鏈球菌在BHI培養(yǎng)基中培養(yǎng)至OD600達到1.0后,將菌液以1:100的比例接種到不同pH值(5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0和8.5)和不同NaCl濃度(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%和3.0%)的BHI培養(yǎng)基中,在96孔板中培養(yǎng)(每孔200μL),每2小時檢測一次OD600,共培養(yǎng)60小時。
如圖A所示,分離得到的這株海豚鏈球菌在pH 6.5~7.5之間生長最佳,最適pH約為7左右。當pH為6.0時,細菌生長遲滯期有所延長,當pH為5.5時,細菌生長遲滯期明顯延長,當pH為8.5時,細菌的生長受到了抑制。
由圖B可知,分離得到的這株海豚鏈球菌在0.5~1.5% NaCl濃度下均能正常生長,最適NaCl濃度為1.0,當NaCl濃度達到2.0%時,細菌生長遲滯期明顯延長,當NaCl濃度達到3.0%時,細菌生長停止。
結論
MGC系列微生物生長曲線分析儀具有氣體環(huán)境監(jiān)控、高通量培養(yǎng)、全自動檢測以及實時顯示生長曲線等的功能,整個過程無需人工頻繁取樣,也無需人員值守,大大降低了污染風險,真正實現(xiàn)了人力的解放和研究效率的提升,將成為您科研路上的得力助手。
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